Inmunohistochemical detection of pandemic SARS-CoV-2 antigens in lung tissue / Detección inmunohistoquímica de antígenos de SARS-CoV-2 en tejido pulmonar

The COVID-19 pandemic caused by the SARS-CoV-2 virus has generated globally more than 110.7 million infections and 2.4 million deaths. The severity of this infection can range from asymptomatic, mild to severe. To know the possible associations between the presence of the virus and histopathological alterations found in tissues of fatal cases of COVID-19, the presence of the virus in the lung tissue of a patient with a clinical history of SARS-CoV-2 infection was evaluated. Lung tissue was histologically processed for immunohistochemical detection of SARS- CoV-2. In the histopathological study, morphological changes associated with pneumonitis of viral origin were observed. Likewise, the location of the SARS-CoV-2 virus was observed mainly in the cytoplasm of the cells of the inflammatory infiltrate.

La pandemia de COVID-19 causada por el virus SARS-CoV-2 ha generado más de 110,7 millones de infecciones y 2,4 millones de muertes a nivel mundial. Esta infección puede ser asintomática y sus manifestaciones clínicas pueden variar entre leves y graves. Para conocer las posibles asociaciones entre la presencia del virus y las alteraciones histopatológicas encontradas en los tejidos de casos fatales de COVID-19, se evaluó la presencia del virus en el tejido pulmonar de un paciente con antecedentes clínicos de infección por SARS-CoV-2. La muestra se procesó para la detección inmunohistoquímica del virus. En el estudio histopatológico, se observaron cambios morfológicos asociados con neumonitis de origen viral. Asimismo, el virus se localizó principalmente en el citoplasma de las células del infiltrado inflamatorio.

The Tillandsia genus: history, uses, chemistry, and biological activity / El género Tillandsia: historia, usos, química y actividad biológica

Tillandsia L. genus comprises 649 species, with different uses at different times. T. usneoides L. uses are reported since the late- archaic and pre-Columbian cultures. In XIX-XX centuries, T. usneoides was used in some manufactured products, as polish and packing fruit. Tillandsia has a favorable reputation as medicine: for leucorrhea, rheumatism, ulcers, hemorrhoid treatment, as an anti-diabetic remedy, emetic, analgesic, purgative, contraceptive, antispasmodic and diuretic. Tillandsia chemical composition includes cycloartane triterpenes and hydroxy-flavonoids, which are present in at least 24 species. Several extracts and compounds from Tillandsia spp. have been reported with pharmacological actions, as anti-neoplasia, hypolipidemic, antifungal, anti-HSV-1, hypoglycemic and microbicide. This review communicates the economic importance, ethnobotany, chemistry composition and biological activities of the Tillandsia genus, and analyze its biological and economic perspective. Tillandsia genus has cultural, economic and pharmacological relevance, with a high potential in many essential aspects of the modern society.

El género Tillandsia L. comprende 649 especies, con diferentes usos en diferentes épocas. T. usneoides L. se han reportado desde el arcáico tardío hasta las culturas precolombinas. En los siglos XIX-XX, T. usneoides se usó en productos manufacturados: como abrasivo y embalaje de fruta. Como medicina tradicional, el género Tillandsia se reporta para leucorrea, reumatismo, úlceras, hemorroides, remedio antidiabético, emético, analgésico, purgante, anticonceptivo, antiespasmódico y diurético. Su composición química incluye triterpenos de tipo ciclo-artano e hidroxi-flavonoides, presentes en al menos 24 especies. Los extractos y compuestos del género Tillandsia se han reportado con propiedades antineoplásicas, hipolipidémicas, antifúngicas, anti-HSV-1, hipoglucemiantes y microbicidas. Esta revisión comunica la importancia económica, etnobotánica, composición química y las actividades biológicas del género Tillandsia, y analiza su perspectiva biológica y potencial económica. Tillandsia tiene importancia cultural, económica y farmacológica, con gran potencial en muchos aspectos esenciales de la sociedad moderna.

Volatile organic compounds from pachyrhizus ferrugineus and pachyrhizus erosus (Fabaceae) leaves / Compuestos orgánicos volátiles de las hojas de pachyrhizus ferrugineus y pachyrhizus erosus (Fabaceae)

In México, Pachyrhizus erosus (Fabaceae) commonly called "jícama", is widely known for its edible tubers. It is cultivated since the pre-Columbian period, and the powdered seeds have been used for the treatment of mange, lice, and fleas, due to their content of rotenone, a well-known insecticidal compound. On the other hand, P. ferrugineus, a wild species can only be found in the Tropical Forests, and has no commercial value. It is known that plants release volatile organic compounds (VOCs) showing qualitative and quantitative differences if are wild or cultivated. VOCs are also involved as repelling or attracting chemical signals to insect herbivores, and their natural enemies. Until now, the VOCs of the leaves of P. erosus and P. ferrugineus have not been investigated. In the present contribution the VOCs of both species were characterized by headspace solid-phase (HS-SPME) extraction and gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS-TOF). In P. erosus 21 VOCs were found, being the most abundant: cyclohexanone (32.8 percent), 3-hexen-1-ol (Z) (32.7 percent), 3-hexenal (Z) (10.5 percent). The majoritarian compounds were C6 or C5 derivatives In P. ferrugineus, the most abundant VOCs were: 5-hexene-1-ol acetate (51.5 percent), undecanal (22.4 percent), 2-hepten-1-al (14.5 percent). The majoritarian compounds were C6, C7 or C11 derivatives.

En México, Pachyrhizus erosus (Fabaceae) es llamada comúnmente "jícama" y es conocida por sus tubérculos comestibles. Se ha cultivado desde el período pre-Colombino y las semillas se han utilizado para el tratamiento tópico de la sarna, piojos, pulgas; las semillas contienen rotenona, un compuesto insecticida. Por otra parte, P. ferrugineus solo está presente en estado silvestre en los bosques tropicales y carece de valor comercial. Se sabe que las plantas liberan compuestos orgánicos volátiles (COV) y muestran diferencias cualitativas y cuantitativas dependiendo, si son silvestres o cultivadas. Los COV también son señales químicas atrayentes o repelentes de los insectos herbívoros y a sus enemigos naturales. Hasta ahora, los COV en las hojas de P. erosus y P. ferrugineus no han sido investigados. En el presente trabajo, los COV se identificaron mediante la microextracción (HS-SPME) en fase sólida, e identificados por cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas (GC-MS-TOF). En P. erosus se encontraron 21 COV, siendo los más abundantes: ciclohexanona (32.8 por ciento), 3-hexen-1-ol (Z) (32.7 por ciento) y 3-hexenal (Z) (10.5 por ciento). Los compuestos mayoritarios son C6 y C5. En P. ferrugineus los más abundantes fueron: 5-hexen-1-ol acetato (51.5 por ciento), undecanal (22.4 por ciento) y 2-hepten-1-al (14.5 por ciento). Los compuestos mayoritarios son C6, C7 o C11.

Virus de la influenza / Influenza Virus

El virus de la influenza es un importante agente patógeno humano que causa infecciones respiratorias y una considerable morbimortalidad anual a nivel mundial. El virus puede circular esporádicamente durante brotes locales como parte de una epidemia estacional o puede generar una pandemia mundial. Durante las epidemias estacionales, la mortalidad se reporta principalmente entre personas muy jóvenes y adultos mayores; la Organización Mundial de la Salud estima que cada año se presentan entre tres y cinco millones de casos de enfermedad grave y de 250.000 a 500.000 muertes en el mundo. Las pandemias de influenza se presentan cuando se produce un reordenamiento genético del virus (antigen shift) que da lugar a una variante antigénicamente novedosa para la cual no hay anticuerpos en la población. Hasta la fecha se han reportado pandemias en 1918, 1957, 1968 y 2009, las cuales causaron la muerte de 60 millones de personas, aproximadamente.

Detección de antígenos del virus del dengue en tejidos post mórtem / Detection of dengue virus antigen in post-mortem tissues

El panorama epidemiológico del dengue ha empeorado durante la última década. Las dificultades para prevenir su transmisión, así como la ausencia de una vacuna o tratamiento específico, lo convierten en un riesgo que desafía las medidas de salud pública y desborda la capacidad de los centros de salud y los sistemas de investigación a muchos niveles. Actualmente, la mayoría de los estudios sobre la patogenia de la infección centran su atención en la respuesta inmunitaria de las células T casi exclusivamente en infecciones secundarias y están dirigidos a identificar los mecanismos implicados en el desarrollo de la permeabilidad vascular y de los eventos hemorrágicos que lo acompañan. En este reporte se describe el caso de una menor de 45 días de edad con signos clínicos de dengue grave, cuyo diagnóstico se confirmó por reacción en cadena de la polimerasa de transcripción inversa en muestras de tejido post mórtem y por herramientas de apoyo diagnóstico de inmunohistoquímica, las cuales detectaron antígenos virales en todos los órganos obtenidos en la necropsia. Este caso subraya la importancia del estudio de las infecciones primarias asociadas a dengue grave, particularmente en niños, en quienes es más probable el desarrollo de la forma grave de la enfermedad sin una infección previa, y, además, pone de relieve la importancia de un diagnóstico que no se limite a las muestras de tejido hepático en el estudio de la patogenia de la infección viral.

The epidemiological situation of dengue has worsened over the last decade. The difficulties in preventing its transmission and the absence of a vaccine or specific treatment have made dengue a serious risk to public health, health centers and research systems at different levels. Currently, most studies on the pathogenesis of dengue infection focus on the T-cell immune response almost exclusively in secondary infections and are aimed at identifying the mechanisms involved in the development of vascular permeability and bleeding events that accompany the infection. This report describes the case of a baby girl less than 45 days of age with clinical signs of severe dengue, whose diagnosis was confirmed by reverse transcription polymerase chain reaction in post-mortem tissue samples and by the ancillary diagnostic use of immunohistochemistry, which detected viral antigens in all organs obtained at autopsy. This case highlights the importance of studying primary infections associated with severe dengue, particularly in children, who are more likely to develop the severe form of the disease without previous infection, and it further stresses the importance of a diagnosis that should not be based solely on the examination of liver tissue samples when studying the pathogenesis of the viral infection.

Glucógeno hepático en dengue severo: análisis histopatológico / Hepatic glucogen in cases with severe dengue: histopathological changes

Antecedentes: El virus del dengue afecta distintos órganos, pero se ha determinado que el hígado es el principal blanco de acción y en donde ocurre la mayor severidad del daño. Existen pocos estudios sobre los cambios histológicos durante la infección por dengue. Objetivos: Analizar las alteraciones histopatológicas post-mortem en hígados de pacientes que presentaron la forma grave del dengue. Métodos: Se revisaron los cortes de hígado de 20 pacientes con dengue severo y se realizaron coloraciones y pruebas para glucógeno. Resultados: Encontramos pérdida de glucógeno citoplasmático en todos los casos analizados y la presencia de glucógeno intranuclear en dos de ellos. Conclusiones: En este estudio se reporta por primera vez la presencia de masas de glucógeno intranuclear en hepatocitos de dos niños fallecidos con dengue grave.

Background: Dengue virus affects various organs, but the liver is the main target of damage and where the most severe damage can occur. There are few studies on the histological changes in the liver during dengue infection. Aims: To analyze the histopathological post-mortem alterations in livers from patients with Methods: We revised serial liver sections, which were stained and tested for glycogen, from 20 patients with severe dengue. Results: We found loss of cytoplasmic glycogen in all cases analyzed and the presence of intranuclear glycogen in two of them. Conclusions: This is the first report of the presence of intranuclear glycogen masses during severe dengue.

Alteraciones morfológicas en pulmón por la influenza A H1N1/v09 en autopsias, Colombia, 2009 / Morphological changes in lung tissue of victims associated with the 2009 A H1N1/v09 influenza pandemic in Colombia

Introducción. La influenza es una infección respiratoria aguda que se presenta de forma estacional y pandémica. En el 2009, la Organización Mundial de Salud (OMS) declaró una pandemia por influenza de tipo A en la que se reportaron en Colombia 3.876 casos de infección, de los cuales 239 fallecieron. Objetivo. Describir los cambios morfológicos asociados a la infección por el virus A H1N1/v09 en tejido pulmonar de autopsias de la pandemia de 2009 en Colombia.Materiales y métodos. Se estudiaron 75 casos con diagnóstico por RT-PCR para el virus A H1N1/v09, de los cuales, 20 fueron seleccionados para el estudio morfológico mediante microscopía convencional de luz, microscopía óptica de alta resolución y electrónica de transmisión e inmunohistoquímica.Resultados. De los 75 casos estudiados, 83 % presentaron pneumonitis viral y 17 % alveolitis. Se observaron complicaciones por hemorragia intraalveolar (66 %) y edema (89 %), daño alveolar difuso (2 %) e infección bacteriana concomitante (32 %).Algunos de los cambios morfológicos observados fueron: destrucción del epitelio alveolary el instersticio, edema, macrófagos con citoplasma vacuolado e infiltración de leucocitos polimorfonucleares en la luz alveolar y el intersticio; vacuolización citoplásmica en neumocitos de tipo I y cuerpos electrodensos en restos celulares en la luz alveolar; inmunorreacción de antígenos virales en el epitelio bronquiolar y en células del infiltrado alveolar. Conclusión. El porcentaje bajo de infección bacteriana concomitante observado en los casos de influenza A H1N1/ v09 en este estudio, es una característica sobresaliente que sugiere que el resultado fatal de la infección, probablemente no esté asociado a una enfermedad bacteriana secundaria, como se ha sugerido en reportes previos. Es probable que las lesiones observadas se puedan atribuir al daño tisular en la respuesta inflamatoria celular y humoral asociada a la infiltración por células poliformonucleares y macrófagos en el intersticio y la luz alveolares, como también por la lesión viral.

Introduction. Influenza is an acute respiratory infection that may be seasonal or pandemic. In 2009 The World Health Organization (WHO) declared an influenza pandemia; 3,876 cases and 239 deaths were reported in Colombia. Objective. The morphological changes in lung tissues associated with virus infection H1N1/v09 were described from autopsied victims.Materials and methods. Seventy-five cases were diagnosed by RT-PCR for influenza A H1N1/v09, of which the lungs of 20 were selected for morphological study by light microscopy, optical microscopy, high-resolution transmission electron microscopy and immunohistochemistry. Results. Of the 75 cases, 83% had viral pneumonitis and 17% alveolitis. Complications included intra-alveolar hemorrhage (66%), edema (89%), diffuse alveolar damage (2%), and bacterial co-infection (32%). Morphological changes were as follows: destruction of the alveolar epithelium and interstitium, edema, macrophages with vacuolated cytoplasm,and infiltration of polymorphonuclear leukocytes in the alveolar lumen and interstitium, vacuolization cytoplasmic type I pneumocytes and electron-dense bodies in cellular debris in the alveolar lumen, and immunoreactivity of viral antigens in bronchiolar epithelial cells and alveolar infiltrate. Conclusion. The low percentage of bacterial co-infection observed in these cases was a prominent feature, and suggested that the fatal result was probably not associated with secondary bacterial disease (Indicated by previous reports). The tissue lesions were attributed to tissue damage due to viral lesion, as well as the cellular and humoral inflammatory response associated with infiltration by polymorphonucleocytes and macrophages in the interstitium and alveolar lumen.

Infestación por triatominos en comunidades indígenas de Valledupar, Colombia / Infestation by triatomine bugs in indigenous communities of Valledupar, Colombia / Infestação por barbeiros em comunidades indígenas de Valledupar, Colômbia

OBJETIVO: Calcular los índices infestación por triatominos en comunidades indígenas en Colombia. MÉTODOS: Se realizó estudio descriptivo en 19 comunidades indígenas del municipio de Valledupar Departamento de Cesar, Colombia. Durante junio a diciembre de 2007 se recolectaron triatominos por búsqueda activa en las viviendas de los indígenas. Los insectos luego fueron identificados por las claves de Lent & Wygodzinsky. Se desarrolló estudio del proceso infectivo en modelo animal y análisis enzimático de cepas de Trypanosoma cruzi, detectadas en heces de triatominos. RESULTADOS: Rhodnius prolixus presentó índice de densidad en las viviendas de 154,7 por ciento, Triatoma dimidiata de 102,45 por ciento, Triatoma maculata de 109,25 por ciento y Panstrogylus geniculatus de 0,3 por ciento. El índice promedio de infestación de las cuatro especies fue de 40,54 por ciento y, el de infección con T. cruzi de 9,4 por ciento. De cinco hemocultivos positivos para T. cruzi, tres se caracterizaron por isoenzimas, clasificándose en T. cruzi grupo I. El estudio de las biopsias reveló pocas características patológicas durante el proceso de infección con las cepas de T. cruzi aisladas de triatominos domiciliados. CONCLUSIÓN: Los altos índices de infestación por triatominos en las viviendas y el índice de infección por T. cruzi, evidencian la transmisión activa de la enfermedad de Chagas, situación que amerita la aplicación de medidas de control vectorial y el estudio seroepidemilógico de la población en riesgo. La identificación de las cepas de T. cruzi como grupo I concuerda con otros estudios realizados en esta región colombiana.

OBJECTIVE: To calculate triatomine infestation indices in indigenous communities in Colombia. METHODS: A descriptive study was carried out in 19 communities in Valledupar Municipality, Cesar Department, Colombia. During June to December, 2007, triatromine bugs were collected from their resting places in households. Taxonomic identification was made according to the keys by Lent & Wygodzinsky. An infection process in animal model and isozyme analysis of triatomine feces were performed. RESULTS: Rhodnius prolixus showed a density index of 154.7 percent, for Triatoma dimidiata was 102.45 percent, T. maculata 109.25 percent and Panstrogylus geniculatus 0.3 percent. The mean infestation index was 40.54 percent, and mean Trypanosoma infection index was 9.4 percent. Of five hemocultures positive for T. cruzi, three were enzimatically identified as T. cruzi group I. Biopsies revealed few pathologic characteristics of infective process with these strains isolated from domiciliary triatomine bugs. CONCLUSIONS: The high triatomine infestation indices in households and the T. cruzi infection index are evidence of active transmission of Chagas disease. The situation merits a vector control program and serological survey of the population at risk. The genetic characterization of T. cruzi strains as group I agrees with other findings on strains in this region of Colombia.

OBJETIVO: Calcular índices de infestação por barbeiros em comunidades indígenas da Colômbia. MÉTODOS: Estudo descritivo em 19 comunidades do município de Valledupar, departamento de Cesar, Colômbia. A coleta de barbeiros foi realizada por busca ativa nas casas dos indígenas de junho e dezembro de 2007. A identificação taxonômica foi feita conforme Lent & Wygodzinsky. A determinação da infecção foi realizada por processo de infecção em modelo animal e análise enzimática em fezes de barbeiros. RESULTADOS: Rhodnius prolixus apresentou nas casas das comunidades um índice de densidade 154,7 por cento, Triatoma dimidiata de 102,45 por cento e T. maculata de 109,25 por cento e Panstrogylus geniculatus de 0,3 por cento, cujo índice de infestação foi de 40,54 por cento, e índice de infecção com T. cruzi de 9,4 por cento. De cinco hemocultivos positivos para T. cruzi, três caracterizam-se como T. cruzi grupo I. O estudo das biópsias revelou poucas características patológicas da identificação do processo de infecção das cepas isoladas a partir de barbeiros domiciliados. CONCLUSÕES: os altos índices de infestação por barbeiros nas casas e o índice de infecção por T. cruzi evidenciam a transmissão ativa da doença de Chagas, situação que merece a aplicação de medidas de controle vetorial e um estudo seroepidemiológico da população sob risco. A caracterização genética das cepas de T. cruzi como grupo I concorda com outros achados para cepas dessa região da Colômbia.

Criptococosis diseminada con compromiso esplénico y meníngeo en una paciente con sida / Disseminated cryptococcosis with splenic and meningeal involvement in a patient with AIDS

Se presenta el caso de una mujer de 37 años de edad, con diagnóstico reciente de infección por VIH, que consultó por cefalea, diarrea, vómito y fiebre de dos semanas de evolución. Se encontraba caquéctica con una gran esplenomegalia. El estudio del líquido cefalorraquídeo demostró una meningitis por Cryptococcus neoformans. Las imágenes diagnósticas evidenciaron una gran esplenomegalia con lesiones focales. La biopsia percutánea con aguja cortante N°18 de una de las lesiones focales confirmó la criptococosis esplénica. La paciente recibió tratamiento secuencial con anfotericina B y fluconazol con una evolución satisfactoria. Las lesiones esplénicas se resolvieron completamente y la paciente se encuentra actualmente asintomática y recibe profilaxis secundaria con fluconazol y terapia antirretroviral (Acta Med Colomb 2010; 35: 31-34).

We present the case of a 37-year-old woman with a recent diagnosis of HIV-infection. The patient consulted because of headache, diarrhea, vomit and fever of two weeks' evolution. The patient had a wasting syndrome, and severe splenomegaly. Cerebral spinal fluid study showed meningitis by Cryptococcus neoformans. CT-scan revealed splenomegaly with focal lesions. Percutaneous biopsy with 18-gauge needle from one of the focal lesions confirmed cryptococcosis. The treatment was initiated with amphotericin B, followed by fluconazole. The patient's evolution has been satisfactory. Splenic lesions resolved and the patient is now asymptomatic and on secondary profilaxis with fluconazole and antiretroviral treatment (Acta Med Colomb 2010; 35: 31-34).

Brote de rabia humana transmitida por gato en el municipio de Santander de Quilichao, Colombia, 2008 / An outbreak of human rabies transmitted by a cat in the town of Santander de Quilichao, Colombia, 2008

Objetivos En marzo de 2008 ocurrió en el municipio de Santander de Quilichao- Cauca, Colombia, un brote de rabia de origen silvestre con 2 víctimas humanas. El presente artículo apunta a describir las técnicas diagnósticas de laboratorio, las acciones de investigación de campo y control de foco empleadas, y su significado epidemiológico e implicaciones en salud pública. Métodos La rabia se diagnosticó por inmunofluorescencia directa, prueba biológica en ratón, histopatología e inmunohistoquímica, y se tipificó utilizando anticuerpos monoclonales. La investigación de campo se enfocó en la búsqueda de contactos humanos y animales, identificación de casos sospechosos y búsqueda institucional de accidentes rábicos. El control de foco consistió en aplicación de tratamiento post exposición a la población expuesta, vacunación canina y felina, recolección y eliminación de animales callejeros y educación a la comunidad. Resultados Dos casos de rabia en humanos fueron diagnosticados y uno en gato por nexo epidemiológico. La variante antigénica 3 fue aislada de los casos humanos. Se vacunaron en total 11 369 caninos, 3 325 felinos y 217 humanos. Conclusiones Se confirma la amenaza para los humanos que representa la rabia en el ecosistema silvestre. El brote tuvo origen en vampiro y el transmisor a los humanos fue un gato confirmando a esta especie doméstica como vínculo entre la rabia de origen silvestre y el ecosistema urbano, por ende su importancia en el enfoque de las acciones de prevención y control de la rabia. Se resalta la necesidad de implementar y mantener acciones para el control de la rabia silvestre que permitan minimizar su impacto en humanos.

Objectives A sylvatic rabies outbreak during March 2008 caused two human deaths in the town of Santander de Quilichao in Cauca, Colombia. This article describes the diagnostic laboratory techniques used, the field investigation and focus control used, as well as this outbreak's epidemiological significance and implications for public health. Methods Rabies was diagnosed by direct immunofluorescence, biological tests involving inoculating mice, histopathology and immunohistochemistry and then typed by using monoclonal antibodies. Field investigation focused on searching for human and animal contacts, identifying suspicious cases and conducting an institutional search for rabid accidents. Focus control consisted of post-exposure treatment of the exposed population, vaccinating dogs and cats, collecting and eliminating stray animals and educating the community. Results Two human rabies cases were confirmed in the laboratory and another was inferred in a cat by epidemiological nexus. Antigenic variant 3 was isolated from the human cases. 11,369 dogs, 3,325 cats and 217 humans were vaccinated. Conclusions This study confirmed that rabies in the wild represents a threat for humans. The outbreak described here originated in vampire bats and was transmitted to humans by a cat, pointing out the nexus between wild rabies and the urban ecosystem which cats represent, thereby becoming a target for rabies' control and prevention activities. This study underlines the urgency of implementing and maintaining rabies control and prevention activities in the wild to minimise its impact on humans.

Brote de rabia urbana transmitida por perros en el distrito de Santa Marta, Colombia, 2006-2008 / Outbreak of urban rabies transmitted by dogs in Santa Marta, northern Colombia

Introducción. En el distrito de Santa Marta ocurrió un brote de rabia urbana entre abril de 2006 y enero de 2008, con cuatro casos fatales en humanos y 28 en perros. Objetivos. Describir el brote, las técnicas de diagnóstico de laboratorio y las acciones de control de foco empleadas. Medir el impacto de la vacunación antirrábica canina en términos de seroconversión de anticuerpos neutralizantes. Discutir el significado epidemiológico y las implicaciones en salud pública. Materiales y métodos. Los casos se diagnosticaron por inmunofluorescencia directa, prueba biológica en ratón e inmunohistoquímica. La tipificación viral se hizo por inmunofluorescencia indirecta. Las acciones de control consistieron en un censo canino, vacunación y tratamientos antirrábicos a la población expuesta, vacunación canina y felina, y educación comunitaria. La seroconversión fue investigada por medio de la prueba ELISA de captura. Resultados. La variante antigénica 1 se caracterizó en todos los casos. Se observó seropositividad en 77% de los perros vacunados y protección serológica contra la rabia, en 47%. No se observaron diferencias de la respuesta humoral entre sexos de los perros, pero sí existieron diferencias de los porcentajes de perros protegidos entre las comunas del distrito. Conclusiones. Este brote de rabia ha sido el de mayor magnitud en una ciudad colombiana, según los datos oficiales. Fue causado por perros, lo cual reitera la amenaza que aún representa la rabia urbana para la salud pública, a pesar de la existencia de vacunas eficientes. El control del brote se logró 20 meses después del primer caso en perros y 14 meses después de haberse iniciado la primera vacunación masiva en animales. Es necesario implementar y mantener acciones para el control de la rabia urbana y evitar su impacto en los humanos.

Introduction. An urban rabies outbreak occurred in the District of Santa Marta between April 2006 and January 2008, which resulted in the deaths of 4 humans and 28 dogs. Objectives. Three objectives were entertained—first, the diagnostic laboratory techniques were described as well as the rabies control actions taken; second, the impact of anti-rabies dog vaccination was assessed in terms of neutralizing antibody seroconversion; and third, the epidemiological significance and public health implications of the outbreak were examined. Materials and methods. Rabies diagnosis was achieved by direct immunofluorescence, inoculation of mice and immunohistochemistry. Typing of the virus was achieved by indirect immunofluorescence. Control activities included a dog population census, vaccination and treatments for persons exposed to rabies, mass vaccination of dogs and cats, and initiation of a community education program. Seroconversion was investigated by capture ELISA. Results. Antigenic variant 1 was detected in all cases. Of vaccinated dogs, 77% were seropositive, and 47% were seroprotected against rabies. No differences were found in the humoral response between dog gender; however significant differences in dog seroprotection were discovered between localized comunities in Santa Marta. Conclusions. The 2006-2008 urban rabies outbreak was the largest reported in a city in Colombia. It was caused by rabid dogs, and demonstrated that these animals are still a threat for human health despite the existence of efficient rabies vaccines. The control of the outbreak was achieved 20 months after the first rabies case in dogs, and 14 months after the initiation of the first mass vaccination of animals. The necessity of implementation and maintenance of rabies control strategies is underlined for minimizing human risk.

Evaluación de las pruebas de PCR TcH2AF-R y S35-S36 para la detección de Trypanosoma cruzi en tejido cardiaco de ratón / Evaluation of TcH2AF-R and S35-S36 primers in PCR tests for the detection of Trypanosoma cruzi in mouse cardiac tissue

Introducción. El trasplante es una opción terapéutica en la cardiomiopatía chagásica. Para la detección temprana de una posible reactivación de la infección, se propone el uso de pruebas de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) a partir de biopsias endomiocárdicas; el modelo de ratón es una aproximación preliminar para evaluar la aplicación de éstas. Objetivo. Evaluar la aplicación de las pruebas de PCR basadas en los iniciadores TcH2AF-R y S35-S36 para la detección de T. cruzi en tejido cardiaco de ratones infectados con el parásito. Materiales y métodos. Se infectaron por vía intraperitoneal dos grupos de ratones ICR de 15 y 10 individuos con 0,3 ml de PBS que contenían 1x106 tripomastigotes de la cepa MHOM/CO/2001/D.A. (T. cruzi I) o 1x104 tripomastigotes de la cepa MHOM/BR/00/Y (T. cruzi II), respectivamente. El seguimiento de la parasitemia se realizó mediante microhematocrito y presencia de parásitos en el corazón a los 30, 60 (modelo agudo), 100 y 150 (modelo crónico) días por medio de histopatología y de las PCR TcH2AF-R y S35-S36. Resultados. La histopatología mostró alteraciones en el miocardio y presencia de amastigotes en los modelos agudo y crónico. En contraste al microhematocrito y al análisis histopatológico, la PCR S35-S36 permitió la detección de ambas cepas del parásito. La PCR TcH2AF-R detectó la cepa T. cruzi I con un desempeño superior al microhematocrito y al análisis histopatológico. Conclusiones. El uso de ambas pruebas de PCR puede ser útil en la confirmación de la reactivación de la infección postrasplante.

Detección por reacción en cadena de la polimerasa de transcriptasa inversa del virus de la fiebre amarilla en monos silvestres: una herramienta sensible para la vigilancia epidemiológica / Detection of yellow fever virus by reverse transcriptase polymerase chain reaction in wild monkeys: a sensitive tool for epidemiologic surveillance

Introducción. La fiebre amarilla es una enfermedad zoonótica mantenida en la naturaleza por primates no humanos; su vigilancia por técnicas sensibles de laboratorio es necesaria para hacer evidente la actividad viral en territorio selvático. Objetivo. Detectar el virus de la fiebre amarilla en muestras de tejido hepático de primates no humanos, mediante la técnica de reacción en cadena de la polimerasa de transcriptasa inversa (RT-PCR) con iniciadores diagnósticos específicos. Materiales y métodos. Se procesaron muestras de tejido hepático de cinco monos del genero Alouatta spp. encontrados muertos en territorio selvático de los departamentos de Cesar y Magdalena entre diciembre de 2003 y junio de 2004. Las muestras fueron tratadas con una solución de lisis para aislar el ARN viral que, posteriormente, fue utilizado en una RT-PCR, utilizando iniciadores específicos para fiebre amarilla; paralelamente, se identificaron proteínas virales mediante inmunohistoquímica sobre cortes de tejido hepático incluidos en parafina. Resultados. Se obtuvieron productos de amplificación del tamaño esperado, (424 pb) en cuatro de las muestras analizadas; estas muestras mostraron, además, una reacción inmunohistoquímica positiva, lo que confirma la presencia del virus. Conclusión. El hallazgo del virus de la fiebre amarilla en monos silvestres representa una evidencia de su actividad enzoótica en nuestro territorio, que incrementa el riesgo de transmisión a humanos y de urbanización por procesos de migración de la población. La detección por técnicas moleculares rápidas y específicas del virus en monos silvestres representa una herramienta de vigilancia epidemiológica que permite activar de manera precoz los sistemas de control necesarios para impedir brotes y epidemias.

Introduction. Yellow fever is a zoonotic infection maintained in nature by non-human primates. Appropriate surveillance with sensitive laboratory techniques is necessary to evidence viral activity in the tropical forest habitats of these primates. Objective. Yellow fever virus was detected in hepatic tissue samples from non-human primates by reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) technique using specific primers for diagnosis. Materials and methods. Hepatic tissue samples were processed from five monkeys belonging genus Alouatta spp found dead in sylvatic areas of Cesar and Magdalena Provinces, Colombia, between December 2003 and June 2004. Samples were treated with lysis buffer prior to the isolation of viral RNA, which was then subjected to reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) using yellow fever-specific primers. Simultaneously, viral proteins were identified by immunohistochemistry on parafin-embedded hepatic tissue. Results. The PCR method amplified fragments of the expected size (424 bp) in four of the tested samples. In addition, these samples showed a positive reaction by immunohistochemistry, supporting the evidence that the virus was present. Conclusion. The detection of yellow fever virus in wild monkeys was clear evidence of enzootic activity in northern Colombia. Increased probability of yellow fever transmission among human populations is indicated due to urbanization processes as a consequence of forced migration and displacement of the human populations. Molecular tests for rapid and specific detection of yellow fever in tissue samples of non-human primates is an important tool for epidemiologic surveillance. Rapid virus identification will permit the timely activation of control systems for prevention of further cases and epidemic situations.

Encefalopatías subagudas espongiformes transmisibles ESET: la teoría Prión - enfermedades priónicas / Creutzfeldt-Jakob syndrome: the prion-diseases theory

La transmisión de algunas enfermedades entre especies ha atraído la atención de los científicos desde el siglo XVIII. El scrapie, la enfermedad de Creutzfeldt-Jakob y otras encefalopatías espongiformes permitieron identificar nuevos agentes infecciosos que no responden a los criterios tradicionales de las enfermedades infecciosas. Los países y sus oficinas sanitarias deben mantener una vigilancia epidemiológica de su conducción respecto a las encefalopatías espongiformes